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proteos哺乳動物細胞表達

更新時間:2020-12-03      點擊次數:1825

 

全長IgG抗體,F(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的表達和純化。我們的抗體生產能力包括構建體設計,瞬時哺乳動物細胞表達,利用內部或客戶提供的表達載體以及親和純化。我們提供分子和酶促方法來生成F(ab)和(Fab')2抗體片段。

 

抗體生產

通過SDS-PAGE進行蛋白A純化的IgG分析

Proteos提供全長IgG抗體,F(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的生產。我們的抗體生產能力包括構建體設計,利用內部或客戶提供的表達載體進行瞬時哺乳動物細胞表達以及親和純化。提供的其他純化服務包括在一次生產運行中多10克抗體的尺寸排阻色譜,通過透析進行的緩沖液交換,內毒素測試,分析SEC和SDS-PAGE(還原和非還原)。

我們行業的瞬態表達平臺利用表達Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權的HEK(人類倉鼠卵巢)和CHO(中國倉鼠卵巢)細胞系,以及包含EBV復制起點(OriP)的專有表達載體允許游離質粒擴增和高水平重組蛋白表達。

我們還提供細胞系擴增,冷凍保存和客戶提供的細胞系庫。總庫將專門為客戶的瞬時或穩定蛋白質生產項目而維護,并將根據其要求銷毀或退還。

我們利用經過優化和經過充分驗證的哺乳動物細胞表達方案,在無血清搖瓶培養體積為30 mL至60 L批次大小的情況下獲得一致,可再現的蛋白表達。僅無支原體,高存活率,低傳代培養用于轉染,并使用Beckman Coulter Vi-cell XR監測培養密度,存活率和平均細胞直徑。Vi-cell XR使用錐蟲藍染料排除方法,平均50次測量結果以計算每個樣品的參數。這使我們能夠高度準確地監測培養,這對于蛋白質生產項目的質量和可重復性至關重要。每個項目隨附的定制技術報告中均包含所有細胞培養數據。

從構建體設計開始,抗體生產的典型生產時間為6-8周。  

全面的生產服務:

  • 全套分子生物學服務可與我們的任何表達平臺一起提供,包括構建體設計,融合伴侶和親和標簽選擇,帶有密碼子優化的基因合成,亞克隆,無內毒素質粒DNA分離和序列驗證。
  • 在小于100 mL的培養規模上進行表達驗證和優化;非常適合并行表達測試多種抗體。
  • 以30毫升的培養規模平行生產8組抗體的中等通量生產。多可以并行生產48個抗體。
  • 在1 L至4 L的培養規模上進行中試規模生產和產量測定;大規模生產之前通過純化進行過程驗證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養體積不超過60 L的HEK或CHO細胞中制備規模的重組全長IgG,抗體片段或抗體融合蛋白。
  • 抗體表達服務可以與Proteos的純化服務結合使用,以實現*定制的蛋白質生產過程。

其他抗體服務:

  • 酶促處理全長IgG以生產F(ab)或F(ab')2抗體片段
  • 從血清,腹水或其他BSL-1生物體液中純化IgG
  • 抗體同型測定
  • 抗體標記(HRP,生物素,FITC等)
  • 抗原產生 

proteos哺乳動物細胞表達

Proteos可在哺乳動物細胞中表達重組蛋白和抗體,包括適當的翻譯后修飾。這些翻譯后修飾通常是有效分泌和功能所必需的,這就是為什么在需要生物功能蛋白的情況下,優選哺乳動物細胞生產的原因。

我們行業的瞬態表達平臺利用表達Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權的HEK(人類倉鼠卵巢)和CHO(中國倉鼠卵巢)細胞系,以及包含EBV復制起點(OriP)的專有表達載體允許游離質粒擴增和高水平重組蛋白表達。

我們還可以在客戶提供的細胞系中提供細胞系擴增,儲存和瞬時表達。

我們經過優化和充分驗證的哺乳動物細胞表達方案可在無血清搖瓶培養體積為每批30 mL至60 L的范圍內提供一致,可再現的蛋白質表達。僅使用無支原體,高存活率,低傳代培養物進行轉染,并使用Beckman Coulter Vi-CELL XR監測其培養物密度,存活率和平均細胞直徑。Vi-CELL XR使用錐蟲藍染料排除方法,平均50次測量值以計算每個樣品的參數。這使我們能夠高度準確地監測培養,這對于蛋白質生產項目的質量和可重復性至關重要。每個項目隨附的定制技術報告中均包含所有細胞培養數據。

從構建體設計到純化的蛋白質,典型的生產時間為6-8周。

服務包括:

  • 全套分子生物學服務可與我們的任何表達平臺一起提供,包括構建體設計,融合伴侶和親和標簽選擇,帶有密碼子優化的基因合成,亞克隆,無內毒素質粒DNA分離和序列驗證。
  • 在小于100 mL的培養規模上進行表達驗證和優化;并行測試多個重組蛋白靶標的理想選擇。
  • 在1 L至4 L的培養規模上進行中試規模生產和產量測定;大規模生產之前通過純化進行過程驗證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養物中,HEK或CHO細胞中重組蛋白的制備規模生產,批量大可達到60L。
  • 交付選項包括細胞糊劑,條件培養上清液,濃縮緩沖液交換的培養上清液或膜制劑。
  • 哺乳動物細胞表達服務可以與Proteos的純化服務結合使用,以實現*定制的蛋白質生產過程。

 

 

 

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